高效液相色谱法测胆固醇含量鉴别地沟油

摘要：利用高效液相色谱法测定地沟油中胆固醇含量，继而定性分析食用油中是否掺地沟油。实验结果表明，当待检菜籽油样品中胆固醇的含量大于0.05mg/g时，可以很明显地观察到胆固醇色谱峰，且菜籽油中胆固醇含量随地沟油的增加呈线性增加，而合格的食用植物油未检测出胆固醇。可利用此特征作为判断植物油中是否掺混了地沟油的依据。
关键词：菜籽油；地沟油；胆固醇；色谱
中图分类号：TS227文献标识码：A文章编号：1002-6630（2009）22-0286-04
　　餐厨废油脂中的地沟油是多种动、植物油脂的混合物，其中含有大量的动物油脂[1]。动物脂肪中普遍含有胆固醇[2]（猪油、猪板油和牛油中胆固醇含量分别为0.75、1.01和1.45mg/g），而在植物油中一般不含或含有极少量的胆固醇[3]，但存在结构上与胆固醇十分相似的物质如谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇等多种植物甾醇[4]。
　　油样经皂化后，胆固醇和甾醇作为不皂化物[5]被提取出来，再采用极性毛细管色谱柱，在设定的液相色谱条件下，可将胆固醇和植物甾醇完全分离[6]。本实验通过制作胆固醇含量标准曲线，利用高效液相色谱法测定地沟油中胆固醇含量，继而定性分析合格食用油中是否掺了废油脂，本研究旨在为检测部门辨别植物油中是否掺有地沟油提供一种准确而且迅速的方法。
1材料与方法
1.1材料与试剂
　　地沟油宁波凌诚再生资源科技开发有限公司；菜籽油、花生油、大豆油、花生调和油和煎炸老油市售。胆固醇标样（纯度≥99%）德国Sigma公司；正己烷（分析纯）、乙醇（分析纯）、0.5mol/LKOH、氮气、磷酸（分析纯）、乙腈（分析纯）。
1.2仪器与设备
　　傅里叶变换红外分光光谱仪、高效液相色谱仪（Varianprostar210泵；335二矩阵检测器；model410进样器）美国Waters公司；10μl平头微量进样器上海安鸽工贸有限公司；5μl微量进样器上海安亭微量进样器厂；电子分析天平（感量0.0001g）；TGL-16A高速台式离心机上海安亭科学仪器厂；空气压缩机和真空泵美国Louisiana公司。
1.3方法
1.3.1样品制备
　　菜籽油中分别掺入质量分数为1%、10%、20%、40%、60%、80%的地沟油样品，分别记为1～6号。对照组食用油有菜籽油、花生油、大豆油、花生调和油。